Szkolenie pt.: „Uzyskiwanie białek rekombinowanych – teoria i praktyka”

19 i 26 listopada oraz 3 grudnia 2024 roku

19 i 26 listopada: 10:00-14:00

3 grudnia: 10:00-12:00

Białka rekombinowane są powszechnie stosowane jako leki czy szczepionki. Mają również ugruntowaną pozycję w testach diagnostycznych, gdzie wykorzystywane są jako antygeny w technikach ELISA, Western blot czy testach immunochromatograficznych. W pracy badawczej są nieodzownym narzędziem w analizach biochemicznych czy immunologicznych, gdzie umożliwiają badanie funkcji i aktywności produktów genów. Dobranie odpowiedniego systemu ekspresyjnego (prokariotyczny, drożdżowy czy hodowle komórkowe), podobnie jak wybór znacznika czy sposobu oczyszczania, nastręcza czasem wielu kłopotów i wymaga rozważenia takich czynników, jak: łatwość manipulacji, czas, koszty oraz prawdopodobieństwo uzyskania białka jak najbardziej zbliżonego do natywnego. Kurs ma na celu zapoznanie z podstawowymi zasadami wyboru systemu ekspresyjnego, doboru znaczników oraz oczyszczania białek rekombinowanych. Przedstawione zostaną zalety i wady systemów bakteryjnych (E. coli), drożdżowych (Pichia pastoris, Saccharomyces cerevisiae) oraz systemów eukariotycznych (Drosophila S2, Spodoptera frugiperda Sf9, CHO). W trakcie szkolenia uczestnicy przejdą ścieżkę projektowania linker starterów, konstrukcji odpowiedniego wektora, wprowadzania rekombinowanego wektora do gospodarza oraz doboru systemu oczyszczania i oceny efektywności oczyszczania białka. Po kursie uczestnicy będą w stanie samodzielnie uzyskać i oczyścić białko rekombinowane oraz wykorzystać go do dalszych badań np.: biochemiczna ocena aktywności, uzyskanie surowicy poli- lub monoklonalnej, wykorzystanie do produkcji testu diagnostycznego.

Szkolenie skierowane jest do osób posiadających podstawową wiedzę na temat pracy z DNA, RNA oraz genetyki, w tym doktorantów, magistrantów i osób posiadających stopień doktora, pracujących w różnych obszarach nauk biologicznych i medycznych. Jest ono przeznaczone dla tych, którzy planują rozpocząć pracę z białkami rekombinowanymi w swoich laboratoriach.

Program szkolenia:

1. Omówienie systemów ekspresji:
   – prokariotyczny (E. coli)
   – drożdżowy (Pichia pastoris, Saccharomyces cerevisiae)
   – eukariotyczny (Drosophila S2, Spodoptera frugiperda Sf9, CHO)
2. Omówienie najbardziej popularnych znaczników wykorzystywanych do oczyszczania białek rekombinowanych
   – Metka histydynowa (His Tag)
   – Białko wiążące mannozę (MBP)
   – Transferaza glutationowa (GST)
3. Dobór odpowiedniego wektora do wykorzystywanego systemu ekspresji.
4. Projektowanie linker starterów.
5. Klonowanie cDNA w wybranym wektorze.
6. Metody wprowadzenia rekombinowanego DNA do komórek.
7. Analiza poprawności wprowadzenia rekombinowanego DNA do komórek.
8. Określenie efektywności ekspresji białka rekombinowanego.
9. Sposoby zwiększania rozpuszczalności białka rekombinowanego i optymalizacja ekspresji.
10. Podstawowe techniki oczyszczania rekombinowanego białka (chromatografia powinowactwa, filtracja żelowa).
11. Omówienie obecności endotoksyn w roztworze białka rekombinowanego oraz sposoby ich usuwania.
12. Analiza czystości rekombinowanego białka.

Forma szkolenia: on-line.

Rejestracja

I tura rejestracji uczestnictwa trwa do 5 września 2024 roku. Zgłoszenia udziału należy kierować poprzez formularz -> LINK

Platforma

Aby bez przeszkód móc uczestniczyć w wydarzeniu użytkując platformę ClickMeeting wystarczy dostęp do Internetu i aktualna przeglądarka internetowa (Chrome, Opera, Firefox, Edge). Zaleca się używać komputer z 4-wątkowym procesorem, min. 8 GB pamięci RAM i aktualnym systemem operacyjnym Windows 8.1, Windows 10 lub Windows 11. W praktyce jednak wystarczy dowolny sprzęt, który płynnie wykonuje zadania biurowe. Platforma streamingowa działa także na systemach operacyjnych Apple oraz dystrybucjach Linux, w tym – systemie Android i ChromeOS.

Ze swojej strony zapewniamy pomoc techniczną w konfiguracji, jak również wsparcie ze strony przedstawicieli platformy.

Terminy

• do 7 listopada 2024 roku – zgłoszenia uczestnictwa, poprzez wypełnienie formularza internetowego,
• 19 i 26 listopada oraz 3 grudnia 2024 roku – termin wydarzenia,
• od 4 grudnia 2024 roku – wysyłka papierowych materiałów – certyfikatów uczestnictwa.

Opłaty

Opłata dla wszystkich uczestników szkolenia wynosi 850 zł brutto (w tym 23% VAT) w I turze rejestracji, 900 zł brutto (w tym 23% VAT) w II turze rejestracji lub 950 zł brutto (w tym 23% VAT) w III turze rejestracji* – osoby planujące skorzystać ze zwolnienia z podatku VAT w sytuacji finansowania uczestnictwa ze środków publicznych proszone są przesłanie informacji przed uiszczeniem opłaty.

DANE DO WPŁAT

Fundacja na rzecz promocji nauki i rozwoju TYGIEL
ul. Głowackiego 35/348, 20-060 Lublin
NIP 946-26-49-975
Numer rachunku: 70 1140 2004 0000 3102 7533 8307
Nazwa Banku: mBank (BRE Wydz. Bankowości Elektronicznej)

Tytuły przelewów: białka rek. + imię i nazwisko Uczestnika

Opłata szkoleniowa zawiera podatek VAT (23%) – osoby planujące skorzystać ze zwolnienia z podatku VAT w sytuacji finansowania uczestnictwa ze środków publicznych proszone są przed uiszczeniem opłaty o poinformowanie nas o tym mailowo oraz o dostarczenie oświadczenia o zwolnieniu z VAT zawierającego następujące informacje:

• podstawę prawną,
• imię i nazwisko uczestnika,
• datę i nazwę szkolenia,
• nazwę organizatora – Fundacji na rzecz promocji nauki i rozwoju TYGIEL,
• podpis osoby upoważnionej ze strony instytucji ubiegającej się o skorzystanie ze zwolnienia z VAT w kwestiach finansowych.

W odpowiedzi potwierdzimy otrzymanie oświadczenia oraz udzielimy informacji na temat wysokości opłaty szkoleniowej w wartości netto.

Regulamin

Regulamin Szkolenia dostępny jest tutaj -> LINK

Kontakt

szkolenia@fundacja-tygiel.pl